通过CRISPR-Cas12f1系统与一体式腺相关病毒联合递送实现治疗性体内基因编辑

基于CRISPR的基因疗法正在临床上取得显著进展。但被最广泛使用的Cas核酸内切酶（包括Cas9和Cas12a）的大尺寸限制了腺相关病毒（AAV）在体内基因编辑中的有效传递。最近设计的V-F型CRISPR-Cas12f1系统凭借其较小的尺寸，能够克服这一瓶颈，在治疗应用中成为强有力的候选者。

2024年2月26日，中国科学院大学Teng Fei和中国科学院动物研究所、北京干细胞与再生医学研究院李伟共通讯在ADVANCED SCIENCE期刊发表题为“Therapeutic In Vivo Gene Editing Achieved by a Hypercompact CRISPR-Cas12f1 System Delivered with All-in-One Adeno-Associated Virus”的研究论文，对不同工程Cas12f1/sgRNA scaffold组合的成对编辑效率进行了系统筛选和优化，发现CasMINI_v3.1/ge4.1系统能够显著提高基因编辑活性。此外，将CasMINI_v3.1/ge4.1包装成单个AAV载体并通过视网膜下注射递送，可实现极高的体内编辑效率，在转导的视网膜细胞中达到70%以上。此外，采用这种基于Cas12f1系统的基因疗法治疗RhoP23H小鼠视网膜色素变性，获得的疗效得到了证明，包括挽救视觉功能和结构保存。且仅检测到极低的旁观者编辑（bystander editing）活动。这项工作推进并扩展了微型Cas12f1系统的治疗潜力，以支持高效、准确的体内基因治疗。

Figure. CasMINI_v3.1/ge4.1-mediated in vivo genome editing.

原文链接：https://doi.org/10.1002/advs.202308095